Salinomycin Inhibited Cell Proliferation and Induced Apoptosis in Human Uterine Leiomyoma Cells

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자궁근종세포에서 Salinomycin의 세포증식 억제와 세포자멸사 유도 효과
Uterine leiomyomas are clinically recognized in about 25% of reproductive-age women and are a major source of gynecologic morbidity. Recently, salinomycin has been shown to be useful for the treatment of cancer. The present study focused on the effects of salinomycin in cell proliferation and apoptosis in primary cultured human uterine leiomyoma cells. Cell viability and cell proliferation assays were conducted. Caspase-3 activity assay and DNA fragmentation assay were performed to determine the effect of apoptosis. The expression of apoptosis regulatory-related proteins was evaluated by western blot. The cell viability and proliferation of uterine leiomyoma cells were significantly reduced by salinomycin treatment in a dose-dependent manner. DNA fragmentation assay results showed apoptotic cell death after salinomycin incubation. Salinomycin activated caspase-3, -8, and -9, causing apoptosis in uterine leiomyoma cells. Down-regulation of Bcl-2, XIAP and FLIP with a concomitant increase in Bax, Fas and DR5 were observed. These results provided the first evidence that salinomycin induce both intrinsic and extrinsic apoptosis. Therefore, salinomycin may be a promising chemopreventive and therapeutic agent against human uterine leiomyoma.
자궁근종은 여성 생식기에서 발생하는 가장 흔한 양성 종양으로 부인과 질병의 주요 원인이며 가임기 여성의 25% 정도에서 발생하는 것으로 알려져 있다. 최근 연구에서 salinomycin은 암 치료에 효과적인 것으로 알려졌다. 본 연구는 자궁근종 일차배양 세포를 대상으로 하여 salinomycin의 세포 증식 억제 및 세포 자멸사 효과를 확인하고자 시도되었다. 세포 생존도는 MTT assay로 측정하였고, 세포자멸사는 caspase-3 활성 측정법과 DNA 분절검사를 시행하였다. 세포자멸사에 관계하는 유전자의 발현을 보기 위해 Western blot analysis를 시행하였다. Salinomycin을 처리한 자궁근종 세포의 세포 증식 변화를 측정한 결과 농도 의존적인 증식 억제를 확인하였으며, 세포내 DNA 분절의 증가를 확인하였다. Salinomycin 처리 후 자궁근종 세포에서 caspase-3, caspase-8 그리고 caspase-9의 활성 증가를 확인하였다. Salinomycin 처리 후 Bcl-2, XIAP 및 FLIP 단백의 발현 감소와 Bax, Fas, DR5의 발현 증가를 확인하였다. 이상의 결과는 salinomycin의 자궁근종 세포 증식 억제 효과가 내인성 경로와 외인성 경로를 통한 세포자멸사 유도에 의한 것임을 확인한 첫 번째 연구이다. 따라서 salinomycin이 자궁근종을 예방하고 억제할 수 있는 치료제가 될 수 있을 것임을 제시하여 준다.
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3. Thesis (학위논문) > 1. School of Medicine (의과대학) > 석사
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