사람 망막아세포종 세포에 발현된 P2Y11 수용체의 확인

Abstract

Purpose: The present study aimed to identify the characteristics and physiological function of the P2Y11 receptor, a receptor likely expressed in human retinoblastoma cells. Methods: We measured possible P2Y11 signaling in WERI-Rb-1 cells using a Ca2+ imaging technique and RT-PCR. Results: 1) 10 μM ATP elicited a strong but transient increase in Ca2+ in the WERI-Rb-1 cells, and this Ca2+ rise was well maintained after external Ca2+-depletion. 2) ATP-induced Ca2+ response arose entirely through Ca2+ mobilization. 3) P2Y11 agonist (BzATP, 100 μM) increased Ca2+ by 31.2±3.7 % of ATP effect. 4)mRNA for P2Y11 subtype was identified using RT-PCR. Conclusions: P2Y11 purinergic activation can increase the intracellular calcium level through calcium mobilization in undifferentiated retinoblastoma cells, which may play an important role in cell proliferation, differentiation, and even pathologic processes.

목적 : 사람 망막아세포종 세포에 발현되어 있는 P2Y11 수용체를 확인하고 생리적 기능의 일부를 규명하고자 하였다. 대상 및 방법 : P2Y11 수용체 활성화를 확인하기 위해 망막아세포종 WERI- Rb-1 세포를 대상으로 칼슘 이미징 기법을 이용하여 세포내 칼슘농도(Ca2+)를 측정하였으며, P2Y11 수용체 mRNA의 발현은 RT-PCR 기법을 사용하였다. 결과 : 1) ATP 투여시 세포내 Ca2+이 증가하였으며, 이는 세포외 Ca2+을 제거하였을 경우에도 유사하게 증가하였다. 2) ATP에 의한 세포내 Ca2+농도의 증가는 세포내 저장소(Endoplasmic reticulum, ER)로부터 동원되는 것으로 나타났다. 3) P2Y11 수용체 효현제인 BzATP 투여시 Ca2+은 ATP에 의한 세포질내 칼슘이온농도의 31.2±3.7%에 해당하였다. 4) RT-PCR 방법을 통해 P2Y11 수용체의 mRNA 발현을 확인하였다. 결론 : 망막아세포종 세포에는 P2Y11 수용체가 발현되어 있으며, P2Y11 수용체를 매개로 한 세포내 칼슘농도의 증가는 세포분화, 증식, 세포사멸, 종양세포로의 병리적 변화 등의 조절기전에 관여하리라 사료된다.