Methylthiazol tetrazolium assay를 이용한 소아백혈병환자 단핵세포의 항암제 감수성 검사

Abstract

Leukemia can be treated with variable methods using diverse agents according to the prognostic factors. Chemosensitivity test was assessed with the MTT assay. Mononuclear cells were harvested from the bone marrow of the leukemic patients and control group, then separated and incubated with 6 drugs for 96 hours. Then cells were incubated with MTT for 6 hours. Optical densities were calculated and LD50 (drug concentration lethal to 50% of the cells) were compared. ALL cells were sensitive to cytarabine, etoposide and arsenic trioxide than AML cells. In the age group of 2―10 year, ALL cells were sensitive to etoposide and arsenic trioxide than AML and control group. In the age over 10 year group, ALL cells were not sensitive to any agents. AML cells showed sensitivity to etoposide in the age over 10 year group. ALL cells from female patients were sensitive than cells from male patients. Cells were more sensitive to adriamycine, cytarabine, mistletoe extract and arsenic trioxide in the group whose initial WBC counts were less than 50,000/mm³ compared to the group whose initial WBC counts were over 50,000/mm³. Using MTT assay, author could compare and confirm the effect of conventional and alternative chemotherapeutic agents in pediatric leukemic cells.

백혈병은 예후인자에 따라 치료 약제와 치료 방법이 달라지고 근래에는 면역요법이나 대체요법제도 치료에 이용되고 있으며 항암제 감수성 검사를 시행하여 그 결과에 따라 약제를 선택한 예들도 보고 되고 있다. 소아 백혈병 환자와 골수 침범이 없었던 질환을 가졌던 환자에서 MTT assay를 이용하여 항암제 감수성 검사를 시행하였다. 약제는 아드리아마이신, 시타라빈, 에토포사이드 외에 대체요법제인 미슬토와 비소, 아가리쿠스를 포함하였다. 골수나 말초혈액에서 단핵세포를 분리한 후 단계별로 희석한 약제와 혼합하여 배양한 후 MTT 용액을 첨가하여 다시 배양하여 처리한 후 570nm에서 흡광도를 측정하였으며 백혈병 세포가 50% 생존하는 약제 농도인 LD50를 구하여 비교하였다. 백혈병 세포별로는 급성 림프구성 백혈병 세포는 시타라빈, 에토포사이드, 비소에 감수성이 높았고, 급성 골수구성 백혈병 세포는 아브노바, 아가리쿠스에 감수성이 있었다. 나이별로는 2―10세 사이에서 급성 림프구성 백혈병 세포는 에토포사이드, 비소에 대해 감수성이 높았으나, 10세 이후에는 감수성이 높은 약제가 없었다. 급성 골수구성 백혈병 세포에서는 2―10세 사이에서 아브노바, 아가리쿠스에 감수성이 높았고, 10세 이후에서 에토포사이드의 감수성이 높았다. 성별로는 남아보다 여아에서 항암제 감수성이 높았으며, 백혈구 수에 따른 항암제 감수성은 5만 이하에서는 5만 이상에 비해 아드리아마이신, 시타라빈, 아브노바, 비소의 감수성이 높았다. 소아 백혈병 세포에서 MTT를 이용한 항암제 감수성 검사를 시행하여 약제들의 효과를 확인하였다. MTT를 이용한 항암제 감수성 검사는 감수성이 있는 항암제를 선택하여 치료성적의 향상을 도모하고 효과 없는 항암제를 사용할 때 발생 가능한 항암제 내성 획득의 위험을 줄이는데 도움이 되리라 추측되며, 향후 더 많은 예에서 지속적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.