두경부 암에서 RT-nested PCR 법을 이용한 MAGE 및 SSX 유전자 발현 검출

Abstract

The human MAGE A and SSX family encode products that can be recognized by autologous immune cells. Because their genes are silent in most normal tissues except testis but are activated in a variety of malignant lesions, MAGE and SSX transcripts represent ideal targets for cancer immunotherapy and diagnosis. In this study, I developed SSX 1－9 assay that detects the expression of 9 SSX subtype genes together by RT-nested PCR using common primers, and studied cancer cell detection efficacy of SSX 1－9 assay and MAGE 1－6 assay in tissue and sputum of the patients with head and neck cancer. The transcripts of MAGE 1－6 and SSX 1－9 genes were detected in 82.8% and 75.9% of head and neck cancer tissue (N=29), respectively, and 96.6% of tissue expressed at least one of MAGE 1－6 or SSX 1－9 genes. In the induced sputum of cancer patients (N=20), the transcripts of MAGE 1－6 and SSX 1－9 genes were detected in 72.2% and 77.8%, respectively, and 94.4% of specimens was positive in MAGE 1－6 or SSX 1－9 assay. These results suggest that combination of MAGE 1－6 and SSX 1－9 assay may be useful for the diagnosis of head and neck cancer. MAGE와 SSX는 암고환항원의 일종으로서 고환을 제외한 정상 성인조직에서는 발현이 안 되나 여러 종류의 암에서는 다양하게 발현되기 때문에 암 면역치료법 및 암진단법 연구에 널리 이용되고 있다. 본 연구에서는 SSX 유전자의 높은 DNA 동질성을 이용하여 공통 primer를 디자인하고 9종의 SSX 아형 유전자 발현을 검출할 수 있는 SSX 1－9 검사법을 개발하였으며, 두경부암환자의 암조직 및 객담을 대상으로 SSX 1－9 및 MAGE 1-6 검사법의 암세포 검출 유효성을 조사하였다. 두경부 암환자의 조직(N=29)에서는 MAGE 1－6 발현이 82.8%, SSX 1－9 발현이 75.9%에서 검출되었으며, 두 유전자군 중 1개 이상 발현한 조직은 96.6%로 나타났다. 암환자의 유도객담(N=18)의 경우 MAGE 1－6 발현이 72.2%, SSX 1－9 발현이 77.8%에서 검출되었으며, 두 유전자군 중 1개 이상 발현한 조직은 94.4%로 나타났다. 객담검사 결과를 암 병기별로 분석한 결과 MAGE는 T1 병기에서 33.3% T2병기에서 88.9% 검출되었으며, SSX는 T1 병기에서 100%, T2 병기에서 77.8% 검출되었다. 이상의 결과는 MAGE 1－6 및 SSX 1－9 검사의 병용이 두경부 암의 진단에 매우 유용함을 나타낸다.