자궁경부암종에서 인유두종 바이러스 감염, p16INK4A와 p18INK4C유전자 변이 및 세포주기조절 단백의 발현

Abstract

Objective : We analyzed the gene status of p16INK4A, p18INK4C, the expression of cell cycle associated proteins (p16INK4A, p18INK4C, cyclin D1, CDK4, pRb, and p53), and human papillomavirus (HPV) infection to investigate whether the inactivation of these genes participated in carcinogenesis, and to evaluated the expression of cell cycle associated proteins and HPV infections. Methods : We examined forty-one primary cervical carcinomas (17 adenocarcinomas, 13 keratinizing squamous cell carcinomas, and 11 nonkeratinizing squamous cell carcinomas) using PCR, comparative multiplex PCR, PCR-SSCP, methylation-specific PCR, and immunohistochemistry. Results : Ninety percent of cervical carcinomas showed HPV infection. HPV type 16 was detected in 41% and HPV type 18 was found in 44%. Homozygous deletions at p16INK4A gene were observed in 2 cases, but the mutation of p16INK4A and alterations of p18INK4C gene were not detected. The promoter hypermethylation for p16INK4A in nine cases (31%) of 29 cervical carcinomas was found. Expression of p16INK4A protein was observed in 93% and p18INK4C protein expression was noted in 78%. Positive immunostaining for cyclin D1 was only identified in 5%, whereas positive immunostaining for CDK4 was observed in 95%. Expression of pRb protein was found in 93% and p53 protein in 24% of cervical carcinomas. Conclusion : These results suggest that high risk HPV infections and methylation of the p16INK4A promoter region seem to play an important role in the pathogenesis of cervical carcinomas. Alterations of p18INK4C gene and cyclin D1-CDK4 pathway does not contribute significantly in the cervical carcinogenesis.

목적 : 자궁경부암종에서 HPV감염과 p16INK4A 및 p18INK4C 유전자 이상과 발현을 조사하고 pRb, cyclinD1, CDK4 및 p53의 발현을 검색하여 자궁경부암종과의 연관성을 조사하고자 하였다. 방법 : 총 41례의 자궁경부암종을 대상으로 PCR, comparative multiplex PCR, PCR-SSCP, methylation-specific PCR 및 면역조직화학염색을 시행하였다. 결과 : HPV 감염은 90%에서 확인되었고, HPV 18형 감염이 44%, HPV 16형이 41%에서 관찰되었다. p16INK4A 유전자 결손은 5%에서 관찰되었으며 promoter부위의 메칠화는 29례 중 9례(31%)에서 확인되었다. p16INK4A 유전자의 돌연변이 및 p18INK4C 유전자의 이상은 관찰할 수 없었고, p16INK4A 및 p18INK4C의 발현은 각각 93%와 78%에서 관찰되었다. Cyclin D1은 5%에서만 발현을 보인 것에 비해 CDK4은 95%에서 발현을 보여 상반된 결과를 보였고 pRb의 발현은 93%에서 발현을 볼 수 있었다. p53 단백에 대한 발현은 24%에서 관찰되었다. 결론 : 자궁경부암종에서 HPV 감염이 종양발생에 가장 중요한 요인이며 p16INK4A 유전자 promoter부위의 메칠화가 종양발생에 일부분 기여할 것으로 생각되고, p18INK4C 유전자의 이상과 cyclin D1-CDK4의 경로에 의한 암화과정은 자궁경부암종과 연관성이 없는 것으로 판단된다.