NM23/NDP kinase 유전자가 도입된 세포주에서 NM23/NDP kinase 유전자와 c-myc 유전자 발현과의 관계

Abstract

Since Steeg, et al (1988) Identified NM23/NDP kinase as non-metastasis gene, other multiple functions of have reported One of them, Postel, et al (1993) suggested that transcription factor PuF, being encoded by NM23-H2/NDP kinase gene, interacts with nuclease hypersensitive element located upstream of the c-myc gene C-myc amplification and activation can be present In squamous cell carcinoma of the head and neck as well as in an increased metastatic propensity for individual tumor To clarity the role of NM23/NDP kinase on c-myc expression, comparison of these two gene expressions m cell lines was done No direct correlation of expression kinetics was found A plasmid containing human c-myc fragment was cloned upstream of chlorampheni-col acetyltransferase (CAT) gene When murine melanoma cell line was cotransfected with a murine NM23-M2 including expression vector and c-myc CAT, CAT activity was elevated, while no change of CAT activity was found m the cotransfectant of human NM23-H2 and c-myc CAT Data suggest that murine NM23- M2 gene transactivates c-myc gene indirectly with a cellular factor in murine cell line Which dose not work with human NM23-H2 gene Additionally, we found same kinetics of NM23- H2/NDP kinase and c-myc expression change correlated with proliferation of PLC/PRF /5 which was induced by HGF.

NM23/NDP kinase 유전자는 1988년 Steeg 등에 의해 항 전이유전자로 알려진 이래 여러 다양한 기능이 보고되었다. 1993년 Postel 등은 NM23/NDP kinase 유전자가 c-myc의 necllease hypersensitive element (NHE)와 반응하는 전사인자 PuF가 NM23/NDP kinase에 그 서열이 있다고 보고하였다. 두경부의 편평상피암에 있어서 c-myc 암유전자의 증폭은 잘 알려져 있으며 전이와도 깊은 관계를 가진다. (Schantz 1993) 이 c-myc 암유전자가 NM23/NDP kinase 유전자에 의한 조정을 규명하기 위해 두 유전자의 발현을 여러 세포주에서 비교하였으나 직접적 관계는 찾을 수 없었다. 전사인자로서 역할을 규명하기 위하여 c-myc 유전자의 분절이 CAT (chloramphenicol acety ltransferase) 유전자 상부에 위치하는 plasmid DNA 를 조성하여 CAT assay를 하였다. 쥐의 흑색종 세포에서 쥐에서 유래된 NM23- M2 와 c-myc CAT를 세포내 도엽 (gene transfer) 하여 CAT 효소의 활성이 증가됨을 보았다. 사람의 NM23- H2 와 c-myc CAT 로 조합하여 쥐의 흑색종 세포에 유전자 세포내 도업을 하였을 경우 앞에서와 같은 CAT 효소의 활성을 볼수 없었다. 쥐세포에서는 쥐에서 유래된 NM23-M2 만 이 c-myc 전사인자로서 역할을 하는 것으로 보아 NM23/NDP kinase 가 전사인자로서 역할을 하기 위해서는 다른 세포성 인자가 필요하다고 여겨진다. 한연 증식이 유도된 사람 간암세포에서도 NM23-H2와 c-myc의 발현 변화가 유사하여 사랑세포에서도 NM23 H2의 c-myc에 대한 전사효과가 유추된다.